A mortalidade por atropelamentos traz sérios impactos à vida silvestre, o que pode afetar a dinâmica das populações de muitas espécies e, portanto, aumentar o risco de declínio local ou extinção. O objetivo deste trabalho foi utilizar técnicas de recuperação, avaliação e criopreservação de espermatozoides epididimários, e realizar a vitrificação de tecido testicular obtidos de diferentes espécies de animais silvestres de vida livre que evoluíram a óbito, vítimas de atropelamento em estradas de Mato Grosso. Foram obtidos os testículos de 17 espécimes vítimas de atropelamento de diferentes espécies (Guerlinguetus poiaiae, Cerdocyon thous, Myrmechophaga tridactyla, Cuniculus paca, Alouatta caraya, Potos flavus, Speothos
venaticus, Sapajus apella, Didelfis albiventris, Tapirus terrestris e Mazama gouazoubira), e recuperados espermatozoides epididimários pela técnica de compressão. O sêmen foi avaliado quanto à motilidade, vigor, integridade de membrana, integridade acrossômica, concentração espermática e morfologia espermática, e quando possível refrigerado ou criopreservado. Na avaliação imediata (material a fresco) dos espermatozoides epididimários, observou-se valores de motilidade variando entre 0 e 80%, e vigor variando de nulo (sem vigor aparente) a 4, além de viabilidade variando de 0 a 85%, integridade acrossomal variando de 0% a 88%, e concentração espermática variando de 0,5 a 1375 x 106 espermatozoides/mL; na avaliação morfológica foram observados defeitos de cabeça, peça intermediária e cauda, sendo gota proximal e distal os defeitos mais encontrados. Em um espécime de Myrmechophaga tridactyla, na refrigeração os espermatozoides epididimários ficaram viáveis por até duas horas utilizando-se Triladyl® ou Andromed®. Na criopreservação, realizada em Cuniculus paca, Potos flavus, Sapajus apella, Tapirus terrestris, Mazama gouazoubira e Myrmechophaga
tridactyla, pós-descongelamento observou-se valores de motilidade variando entre 0 e 10%, e vigor variando de nulo a 2, além de viabilidade variando de 2 a 11%, integridade acrossomal variando de 1,5% a 20% utilizando Andromed®; e motilidade variando entre 0 e 40%, e vigor variando de nulo a 3, além de viabilidade variando de 2 a 22%, integridade acrossomal variando de 3% a 18% utilizando Triladyl®. Na vitrificação do tecido testicular em Cuniculus paca, Allouata caraya, Potos flavus, x Speothos venaticus, Sapajus apella, Didelphis albiventris, Tapirus terrestris, e Myrmechophaga tridactyla, observa-se dano tecidual e na organização estutural ao utilizar meio de vitrificação com e sem crioprotetor (associação de Etileno Glicol e Dimetilsulfoxido), porém o epitélio germinativo apresenta aparência mais organizada nestes meios em comparação ao material a fresco. Conclui-se que é possível recuperar os espermatozóides epididimários das espécies Guerlinguetus poaiae, Cerdocyon thous, Myrmecophaga tridactyla, Cuniculus paca, Allouata caraya, Potos flavus, Sapajus apella, Tapirus terrestris, e Mazama gouazoubira realizando a compressão do epidídimo. Nas espécies Cuniculus paca, Myrmecophaga tridactyla, Potos flavus, Sapajus apella, Tapirus terrestris, e Mazama gouazoubira foi possível realizar a criopreservação desse material, onde o diluidor Triladyl® demonstrou resultados superiores quando comparado ao Andromed® nas espécies avaliadas. Houve uma aparente preservação de epitélio germinativo após a vitrificação de tecido testicular nas diferentes espécies, no entanto, são necessários mais estudos para determinar a viabilidade da técnica utilizada.
Palvra-chave: reprodução
Detecção de Brucella Spp. em sangue, sêmen e swab vaginal de cães da Região Metropolitana De Cuiabá/MT
A Brucelose é uma zoonose causada pela bactéria gram negativa Brucella spp., uma doença infecciosa-contagiosa crônica que afeta principalmente o
sistema reprodutivo dos animais e gera prejuízos econômicos e sanitários. O objetivo do presente estudo foi diagnosticar à Brucella spp. em cães a partir de diferentes amostras biológicas (sangue, sêmen e swab vaginal). Foram utilizados cães com idade, peso e sexo variados, provenientes de canis no município de Cuiabá e Várzea Grande/MT. Inicialmente, foi feito o levantamento do histórico reprodutivo dos animais e estes foram submetidos à avaliação clínica geral e específica do trato reprodutivo. Nos machos foi realizado o exame andrológico e nas fêmeas exame ginecológico. Em seguida foi coletado sangue em todos os animais (n=35); sêmen nos machos (n=9) e swab vaginal (n=24) nas fêmeas para realização da técnica de Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) para brucelose. Das fêmeas analisadas, 15 (62,5%) possuíam origem externa ao canil, 17 (70,85%) maternidade confirmada, 8 (33,3%) foram positivas na PCR de Brucella spp. em sangue e 10 (41,7%) em swab vaginal, no entanto, apenas 2 (8,4 %) apresentaram sintomas clínicos, onde Fêmea 1 (F1) apresentou aborto (60 dias de gestação) e Fêmea 2 (F2) apresentou infertilidade.
Foi encontrado anormalidade no corpo do útero em uma das fêmeas na avaliação ultrassonográfica (F1). Dos machos avaliados (n=11), 7 (63,6%) eram
de origem externa ao canil e 8 (72,7%) com paternidade confirmada. A coleta de sêmen foi realizada em 9 animais, 4 (44,44%) foram positivos na PCR de Brucella spp. em sangue e 2 (18,2%) em sêmen, sendo que 3 (33,3%) positivos apresentaram sinais clínicos, onde Macho 3 (M3), apresentou dificuldade na copula devido a um problema locomotor e por isso foi castrado, Macho 7 (M7) apresentou uma infecção ocular e Macho 10 (M10) apresentou infertilidade. A parte andrológica também demonstrou ser impactada negativamente, animais positivos na PCR sêmen e/ou sangue apresentaram menor motilidade, vigor, concentração, integridade de membrana e acrossoma. Os defeitos secundários demonstraram maior impacto nos animais positivos variando entre 20% à 38%, sendo eles gota distal, gota proximal, cauda quebrada sem gota, e cauda quebrada com gota. Concluímos que foi possível diagnosticar Brucella spp. em machos e fêmeas por PCR nas diferentes amostras biológicas analisadas indicando que a PCR de swab vaginal é um teste efetivo para identificar Brucella spp. em fêmeas, no entanto, em machos o teste em sangue ainda é o mais indicado.
Cateterização uretral após indução farmacológica para coleta de sêmen em cães.
Os agentes alfa adrenérgicos influenciam a ereção e a ejaculação, sendo o reflexo ejaculatório o principal evento mediado por receptores alfa adrenérgicos. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi descrever a coleta farmacológica de sêmen pela técnica de cateterismo uretral em cães domésticos utilizando a associação dexmedetomidina (Dexdomitor, Zoetis, Finlandia) e cetamina (Ketalex, Vencofarma, Brasil). Para a determinação da dose, a coleta de sêmen foi realizada com doses crescentes de dexmedetomidina (5μg / kg, n = 2; 10μg / kg, n = 2 e 15μg / kg, n = 2) associadas a
3mg / kg de cetamina em seis animais. Uma vez estabelecida a dose, foi realizada a coleta adicional de sêmen com 15μg / kg de dexmedetomidina e 3mg / kg de cetamina em nove cães. Após o procedimento, volume espermático (0,087 ± 0,027 mL), motilidade total (60,5 ± 8,08%), vigor (1,9 ± 0,28), concentração espermática (2458 ±1303,44 x 106 espermatozoides / mL), integridade de membrana plásmatica (84,2 ±13,97%), integridade acrossomal (75,2 ± 18,83%) e morfologia normal dos espermatozóides (57,35 ± 6,49%) foram avaliados. De acordo com os resultados apresentados, este estudo demonstra que a coleta de sêmen por cateterismo uretral após estimulo farmacológico utilizando a associação dexmedetomidina-cetamina pode ser realizada em cães, permitindo obter sêmen apto à aplicações em
biotecnologias, apesar da contaminação por urina.
Cateterização uretral após indução farmacológica para coleta de sêmen em cães
Os agentes alfa adrenérgicos influenciam a ereção e a ejaculação, sendo o reflexo ejaculatório o principal evento mediado por receptores alfa adrenérgicos. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi descrever a coleta farmacológica de sêmen pela técnica de cateterismo uretral em cães domésticos utilizando a associação dexmedetomidina (Dexdomitor, Zoetis, Finlandia) e cetamina (Ketalex, Vencofarma, Brasil). Para a determinação da dose, a coleta de sêmen foi realizada com doses crescentes de dexmedetomidina (5μg / kg, n=2; 10μg / kg, n=2 e 15μg / kg, n = 2) associadas a 3mg / kg de cetamina em seis animais. Uma vez estabelecida a dose, foi realizada a coleta adicional de sêmen com 15μg / kg de dexmedetomidina e 3mg / kg de cetamina em nove cães. Após o procedimento, volume espermático (0,087 ± 0,027 mL), motilidade total (60,5 ± 8,08%), vigor (1,9 ± 0,28), concentração espermática (2458 ± 1303,44 x 106 espermatozoides / mL), integridade de membrana plasmática (84,2 ± 13,97%), integridade acrossomal (75,2 ± 18,83%) e morfologia normal dos espermatozoides (57,35 ± 6,49%) foram avaliados. De acordo com os resultados apresentados, este estudo demonstra que a coleta de sêmen por cateterismo uretral após estímulo farmacológico utilizando a associação dexmedetomidina-cetamina pode ser realizada em cães, permitindo obter sêmen apto à aplicações em biotecnologias, apesar da contaminação por urina.
Comparação entre coletas de sêmen em Gato-do-Mato-Pequeno (Leopardus guttulus) pelos métodos de cateterismo uretral e eletroejaculação
A redução e fragmentação do habitat colocam em risco as populações de felinos silvestres, acarretando em uma diminuição da variabilidade genética. Considerando a atual realidade dos pequenos felídeos silvestres mantidos em cativeiro, objetivou-se comparar o cateterismo uretral e a eletroejaculação após anestesia com cetamina-dexmedetomidina, como método de coleta de sêmen de gato do mato pequeno (Leopardus guttulus) mantidos em cativeiro e avaliar os valores de volume, concentração, vigor, motilidade, vitalidade espermática e integridade de acrossoma antes e após o congelamento do sêmen coletado com as diferentes técnicas. Inicialmente foram utilizados 13 animais para coleta de sêmen por cateterismo utilizando-se diferentes doses da associação cetamina-dexmedetomidina. Após a determinação da dose anestésica ideal para coleta de sêmen nesta espécie, os gatos-do-mato-pequenos (L. guttulus) machos tiveram o sêmen coletado pelo método de cateterismo e eletroejaculação, e após análise descritiva o sêmen foi congelado. A dose ideal para coleta de sêmen foi de 0,008 mg/kg de dexmedetomidina. Houve diferença significativa (p ≤ 0,05) para a variável concentração, de acordo com o tipo de coleta utilizado, sendo que a técnica do cateterismo apresentou concentração espermática maior comparada à técnica de eletroejaculação. Os resultados de motilidade, vigor, patologias, vitalidade e integridade acrossômica não apresentaram diferença significativa (p ≥ 0,05). Houve diferença significativa (p ≤ 0,05) de acordo com a forma de armazenamento do sêmen, evidenciando que o congelamento impacta na qualidade do sêmen em L. guttulus independente da técnica de coleta utilizada. Esses resultados, somados às vantagens do método de cateterismo como a baixa contaminação por urina, facilidade e rapidez na coleta e baixo custo à torna uma técnica viável e promissora para utilização em felinos selvagens de vida livre, principalmente aqueles em risco de extinção.
Histologia do aparelho reprodutor masculino de Boa constrictor constrictor e sua relação com aspectos da biologia reprodutiva.
Com aproximadamente 3700 espécies e pertencentes à Ordem Squamata, as serpentes representam o segundo grupo mais diverso dentro dos répteis. Caracterizar os órgãos reprodutivos deste grupo possibilita compreender mais precisamente os aspectos morfológicos e fisiológicos que envolvam a reprodução, além de informações acerca da espermatogênese, e fornece valiosas informações que aprimoram as técnicas reprodutivas aplicadas a estes animais. Desta forma, objetivou-se com este trabalho descrever histologicamente o aparelho reprodutor masculino de Boa constrictor constrictor, correlacionando estes achados com aspectos da biologia reprodutiva desta espécie. Foram obtidos os sistemas reprodutor e renal de dois espécimes machos de Boa c. constrictor de vida livre, e os testículos e parte dos ductos deferentes de um espécime de Boa c. constrictor macho mantido em cativeiro. Os órgãos foram cortados a uma espessura de 3μm em micrótomo, coradas com Azul de Toluidina 1%, coloração Ácido Periódico-Schiff (PAS) e coloração Tricrômico de Masson, fotodocumentados e descritas. Os achados histológicos evidenciam particularidades no hemipênis (musculatura estriada com núcleo centralizado), além de estruturas anexas de aspecto tubular e aspecto acinar observadas em proximidade com o epidídimo, na porção médio- caudal deste, possuindo aspecto secretor, evidenciado na coloração de Azul de Toluidina e no PAS. Além disso, os achados histológicos juntamente com o período de cópulas relatado na literatura assemelha-se ao padrão pré-nupcial observado em outras serpentes.
ESTUDO CASO-CONTROLE AVALIANDO OS FATORES DE RISCO RELACIONADOS À NATIMORTALIDADE EM LEITÕES DO CENTRO OESTE DO BRASIL
Falhas reprodutivas em suínos são muitas vezes um problema de diagnóstico difícil. O objetivo do trabalho foi identificar potenciais fatores de riscos (infecciosos / não infecciosos) correlacionados com a ocorrência de leitões natimortos em duas granjas comerciais de suínos situadas na região centro-oeste do Brasil. Os dados foram coletados a partir do acompanhamento de 96 fêmeas suínas com natimorto (casos) e 96 fêmeas sem natimortos (controles).
ESTUDO CASO-CONTROLE AVALIANDO OS FATORES DE RISCO RELACIONADOS À NATIMORTALIDADE EM LEITÕES DO CENTRO OESTE DO BRASIL
Falhas reprodutivas em suínos são muitas vezes um problema de diagnóstico difícil. O objetivo do trabalho foi identificar potenciais fatores de riscos (infecciosos / não infecciosos) correlacionados com a ocorrência de leitões natimortos em duas granjas comerciais de suínos situadas na região centro-oeste do Brasil. Os dados foram coletados a partir do acompanhamento de 96 fêmeas suínas com natimorto (casos) e 96 fêmeas sem natimortos (controles). Os potenciais fatores de risco foram incluídos no modelo de regressão logística multivariada e alguns dados foram categorizados: parição (1, 2, 3-6 e > 6), momento do parto (durante o dia ou noite: entre 6:00h-20:00h e as 20:00h-06:00h, respectivamente) e de duração do parto (< 2hs, 2- 4hs e > 4hs).